细菌染色液是微生物实验中观察细菌形态结构以及掌握细菌代谢、繁殖等情况的常用普及技术。为进一步提高实验中细菌形态的观测质量，本文就对常用细菌染色液进行了改良，据实验结果显示，其改进后方法操作更加简单，更有效起到细菌染色作用及观测作用。
 

　　细菌染色液的原理：
 

　　细菌经结晶紫初染染成蓝色。革兰氏染色阳性菌(G+)细胞壁肽聚糖层数多，且肽聚糖为空间网状结构，再经乙醇脱水，网状结构更为致密，染料复合物不易从细胞内漏出，仍为蓝色。而革兰氏染色阴性菌(G-)细胞壁脂类含量多，肽聚糖层数少，且肽聚糖为平面片层结构，易被乙醇溶解，使细胞壁通透性增高，结合的染料复合物容易泄漏，细菌被脱色为无色，再经石炭酸复红稀释液复染成红色。

　　细菌染色液的操作步骤：
 

　　载玻片清洗――选择新的光滑无划痕的载玻片，浸泡于洗洁精充分溶解的水中，煮沸20min，稍冷后取出用自来水冲洗干净并沥干，然后浸泡于95%乙醇溶液中。用时取出，在酒精灯火焰上烧去酒精后即可使用。
 

　　菌液制备――将分装于试管中的无菌水缓慢地倒人经4～5代转接培养的斜面培养物中，不要摇动试管，让菌体在水中自行扩散。注意蒸馏水预先在恒温培养箱中保温，使之于与菌种同温。置于恒温培养箱中保温10min。目的是让没有鞭毛的老菌体下沉，而具有鞭毛的菌体在水中松开鞭毛。
 

　　涂片――用吸管从菌液上端吸取菌液于洁净的载玻片一端，稍稍倾斜玻片，使菌液缓慢地流向另一端。
 

　　干燥――在空气中自然干燥。
 

　　染色――滴加硝酸银染色液A液，染色4～6min；用蒸馏水轻轻地充分洗净A液。用B液冲去残水，再加硝酸银染色液8液于玻片上。用酒精灯微火加热至有蒸汽冒出，维持1mm左右。注意加热时应随时补充B液，不可使玻上B液蒸干。用蒸馏水冲洗，干燥。