配好的瑞氏染色液可以用这个方法进行鉴定
更新时间:2022-11-15 点击次数:1327次
瑞氏染色液由碱性染料美蓝和酸性染料美蓝组成。不同的细胞对染色液有不同的亲和力。例如,血红蛋白和嗜酸性粒是碱性蛋白,在酸性染色溶液伊红结合,并被染成粉红色;核蛋白、淋巴细胞和嗜碱性粒细胞的细胞质呈酸性,与碱性染色液美蓝或天青结合,染成紫蓝色或蓝色;中性粒子可以在等电状态下与伊红和美蓝结合,并被染成浅紫红色。
细胞的所有成分都属于蛋白质。因为蛋白质是两性电解质,它们携带的电荷取决于溶液的pH值。在酸性环境中,正电荷增加,很容易与伊红结合。红细胞和嗜酸性粒细胞呈红色,细胞核呈淡蓝色或未染色;在碱性环境中,负电荷增加,容易与美蓝结合。所有细胞都是灰蓝色,颗粒是深色的,嗜酸性颗粒是深棕色,甚至是棕黑色,中性颗粒是厚的,紫黑色。稀释的染料溶液必须是磷酸盐缓冲溶液(pH6.4~pH6.8),冲洗水应接近中性,否则可能导致细胞异常染色,难以识别形态。
用法说明:
1.取样品涂片,自然干燥;
2.加入溶液A3-5滴,固定1min;
3.加入溶液B3-5滴,轻轻晃动玻片,静置染色3-5min;
4.用蒸馏水冲洗,待干,镜检。
瑞氏染色液的鉴定方法:
刚配好或放置一个月以上的瑞氏染色液可进行下列鉴定:
1.取1滴瑞氏染色液于乳白玻板上,自行迅速扩散开,其颜色变紫红色,且有伪足形成;
2.取1滴染色液加1滴缓冲液,染色液由深蓝色立即变为紫红色;
3.取血片或骨髓片进行试染检查,观察染色后各类细胞的胞核、胞浆及颗粒着色情况,pH是否合适及染色合适时间。如有上述变化,表明染色液合格,可供使用。