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细胞染色液在检验方面有哪些独特的原理及方法
发布时间:2018-12-17   点击次数:843次
  细胞染色液是一种适用于活细胞细胞核染色的溶液。仅需染色10分钟就能用荧光显微镜观察到非常明亮的细胞核蓝色荧光染色。
 
  细胞染色液检验原理:
  细胞染色液是采用世界卫生组织推荐的染色方法而配制,它跟瑞氏染色一样,都是利用Romanowsky Stain技术原理改良而成的,所得到的结果也跟瑞氏染色液相类似。但迪夫快速细胞染色所花费的时间较短,约1分钟30秒即可完成染色步骤。较适合于批量浸染,更加节省染色时间,且具背景清晰无沉渣等特点。
  本染色液系利用Romanowsky Stain技术原理改良而成,染色液中含有酸性染料和碱性染料利用各待染物质对染料的亲和力不同,呈现不同的着色而达到辨别其形态、特征的目的。
 
  细胞染色液检验方法:
  一、滴染法:
  1、将1包磷酸盐缓冲液粉剂溶于1L蒸馏水后,装于两个500ML冲洗瓶中备用。
  2、加迪夫A溶液覆盖整个涂片染色(20-30)秒。
  3、用磷酸盐缓冲液冲洗,洗掉迪夫A溶液,然后稍甩干缓冲液。
  4、再滴加迪夫B溶液 覆盖于整个涂片染色(20-30)秒。
  5、水洗、干燥、镜检。
 
  二、浸染法:
  1、将1包磷酸盐缓冲液粉剂溶于1L蒸馏水后,装于两个500ML冲洗瓶中备用。
  2、分别把迪夫A溶液、 迪夫B溶液、磷酸盐缓冲液适量倒于带盖的染缸中。
  3、把涂片浸泡于迪夫A溶液(20-30)秒。
  4、于磷酸盐缓冲液的染缸中洗掉迪夫A溶液 ,稍甩干缓冲液。
  5、再把涂片浸泡于迪夫B溶液(20-30)秒。
  6、水洗、干燥、镜检。
 
  细胞染色液样本要求:
  1、血细胞涂片染色:要求新鲜全血或EDTA·K2抗凝血。
  2、阴道分泌物涂片染色:新鲜标本离开人体涂片后,需尽快以火焰或酒精固定,以避免细胞变形。
  3、骨髓涂片染色:涂片制成后,应在空气中快速摇动或扇干,防止细胞皱缩变形或因空气潮湿而溶血,不能用高温或火烤。
  4、脱落细胞涂片染色:采取检体并涂片,待检涂片固定可采用自然干燥法或湿片固定液固定法。一般情况下若采用湿片固定法,标本浸泡时间稍长些,效果会更佳。若采用湿片固定液固定标本,固定液用后需经常过滤,更换,防止细胞交叉污染。
 
  细胞染色液注意事项:
  1、 固定液采用Carnoy固定液。
  2、 甲苯胺蓝染色后不宜采用低浓度乙醇脱水,否则容易导致褪色。
  3、 分色后应快速入95%乙醇、无水乙醇、二甲苯的时间不宜过久,否则容易导致褪色。
  4、 针对于胃粘膜组织、软骨组织等较难着色组织的染色,浸染于甲苯胺蓝染色液的时间应相应延长。

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