瑞氏染色液在使用上的原理以及注意事项
发布时间:2019-01-21 点击次数:3090次
瑞氏染色液是酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝组成的复合染料, 对原生质的染色有很好的区别作用。各种细胞成分化学性质不同,对各种染料的亲和力也不一样,如血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质为酸性,与碱性染料结合后,染紫蓝色或蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫红色,称为嗜中性物质。
瑞氏染色液的原理:
瑞氏染色法使细胞着色既有化学亲和反应,又有物理吸附作用。瑞氏染料由酸性染料伊红和碱性染料美蓝的氧化物组成,其深于甲醇后,解离为带正电的美蓝和带负电的伊红离子。各种细胞由于其所含化学成分不同,对染料的亲和力也不一样,因此,染色后各种细胞呈现出各自的染色特点。
瑞氏染色液使用方法:
1、常规方法制备血液涂片或骨髓涂片或细菌涂片,待涂片自然干燥。
2、将血液涂片或骨髓涂片置于染色架上。
3、滴加适量Wright Stain覆盖涂片,室温染色1~2min。
4、涂片滴加等量磷酸盐缓冲液,轻轻晃动玻片或采用其他方式混合,使磷酸盐缓冲液与WrightStain混匀,室温静置3~10min。
5、用自来水或蒸馏水从玻片一端轻轻冲洗。
6、干燥。
7、镜检:先用低倍镜观察血涂片,再用油镜。

瑞氏染色液注意事项:
1、染色过深可用甲醇或酒精适当脱色,不复染。
2、如果染色过深或过浅,应调整染色时间或工作液浓度。
3、血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀,以免影响染色效果。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
5、染色液可重复使用,但不能多次重复,若有沉淀物应过滤后使用。
6、pH值对染色有一定影响,载玻片应清洁、无酸碱污染,以免影响染色效果。
7、涂片染色中,请勿先去除染液或直接对涂片用力冲洗。不能先倒掉染液,以免染料沉着于涂片上。