瑞氏染色液的使用方法以及具体作用进行详细说明
发布时间:2019-02-22 点击次数:2846次
瑞氏染色液的理化原理:
瑞氏染料是由碱性染料美蓝和酸性染料黄色伊红合称伊红美蓝 染料即瑞氏染料。伊红钠盐的有色部分为阴离子,无色部分为阳离子,其有色部分为酸性,故称伊红为酸性染料。美蓝通常为氯盐是碱性的,美蓝的中间产物结晶为三氯化镁复盐,其有色部分为阳离子,无色部分为阴离子,恰与伊红钠盐相反。
甲醇是瑞氏染色液良好溶剂,有两种作用:
1、甲醇使瑞氏染料中美蓝( M )与伊红( E )在溶液中离解,可使细胞成分选择性吸附其中的有色物质而着色。 在配制的瑞氏染液中美蓝如放置过久即可氧化而含有天青,美蓝天青与伊红化合物能使核染成紫红色,但不能使胞浆染为蓝色,多余 美蓝就可以 使胞浆染成蓝色,染色主要是化学作用,是离子彼此结合的反应。
2、甲醇具有强大的脱水力,可将细胞固定在一定形态及增加细胞结构的表面积,提高细胞对染料吸收作用,同时由于甲醇吸附染色液中的水,使染色液升温,加速染色反应。
1、取1滴染液于乳白玻板上,自行迅速扩散开,其颜色变紫红色,且有伪足形成。
2、取1滴染液加1滴缓冲液,染液由深蓝色立即变为紫红色。
3、取血片或骨髓片进行试染检查,观察染色后各类细胞的胞核、胞浆及颗粒着se情况,pH是否合适及染色合适时间。如有上述变化,表明染液合格,可供使用。

瑞氏染色液的使用方法:
1、瑞氏染剂含甲醇,薄血膜不需先固定;而厚血膜则需先经溶血,待血膜干后才能染色。
2、染色前先将溶过血的厚血膜和薄血膜一起用蜡笔划好染色范围,以防滴加染液时外溢。
3、滴染液使覆盖全部厚、薄血膜上,30秒至1分钟后用滴管加等量的蒸馏水,轻轻摇动载玻片,使蒸馏水和染液混合均匀,此时出现一层灿铜色浮膜,3~5分钟后用水缓慢从玻片一端冲洗。
4、凉干后镜检。